GONZALO DE LA ROSA MANRIQUE DE LARA, ANA ISABEL GOMEZ SANCHEZ, PABLO PELEGRIN VIVANCOS,

• [GI/IMIB/C003/2011] Cirugía digestiva, endocrina y trasplante de órganos abdominales

La presencia de nucleótidos en baja concentración en sobrenadantes de células apoptóticas reduce los niveles de producción de citoquinas proinflamatorias como son TNF-alfa e IL-6, cuando se pretrata a distintos tipos de macrófagos con estos sobrenadantes. Sin embargo poco se sabe de su efecto sobre el inflamasoma y las citoquinas dependientes del mismo.

La población de macrófagos murinos residentes del peritoneo (MPRs) se obtuvo mediante lavado de la cavidad peritoneal de ratones de la cepa C57BL/6 (Harlan). Se enriquecieron deplecionando linfocitos B mediante el uso de anticuerpos acoplados a micropartículas magnéticas antiCD19 y antiCD5. Se cultivaron los macrófagos en presencia de agonistas o inhibidores del receptor P2Y2R y se activarion en una primera fase con lipopolisacárido bacteriano y en una segunda fase con activadores de inflamasoma como el ATP a altas concentraciones (3mM). Los sobrenadantes se analizaron por ELISA . Para el análisis del número de copias de ARN mensajero de distintos genes, se lisaron las células en momentos previos a la segunda activación.

La suplementación de nucleótidos tipo ATP y UTP a concentraciones micromolares con anterioridad a la activación celular por lipopolisacárido, resultó en un aumento de la producción de IL-1beta. Sin embargo, la cantidad de TNF-alfa producida se ve reducida. El uso de un inhibidor específicos del receptor purinérgico P2Y2R, AR-C 118925xx, redujo significativamente dichos cambios.

La activación del receptor purinérgico P2Y2R mediante el uso de ligandos naturales como son el ATP y el UTP produce un efecto sinérgico en la generación de IL-1b en macrófagos peritoneales de ratón, a la vez que reducen los niveles de TNF-alfa. Este resultado apunta a la generación de un tipo específico de inflamación, al influir de manera opuesta en la producción de dos de las citoquinas proinflamatorias más comunes conocidas.